Beschreibung
Rund 90 % aller soliden Tumoren und 85 % der hämatopoetischen Neoplasien sind aneuploid. Aneuploidie beschreibt eine numerische Chromosomenaberration, bei der einzelne Chromosomen zusätzlich zum üblichen Chromosomensatz vorhanden sind oder fehlen. Darüber hinaus ist Hyperploidie ein Hauptmerkmal mehrerer Fibrosarkomzelllinien, die im Institut für Veterinär-Pathologie der Justus-Liebig-Universität Giessen, Giessen, Deutschland, etabliert wurden. In dieser Studie haben wir die Chromosomenzahl der Fibrosarkomzelllinien bestimmt, indem wir Chromosomen durch Kennzeichnung eines DNA-bindenden Proteins (Centromer-Protein B) immunofluoreszenzmarkiert und in der Interphase gezählt haben. Anschließend haben wir die Aneuploidie in Formalin-fixiertem und Paraffin-eingebettetem Gewebe (FFPE) von histologisch diagnostizierten spontanen felinen Fibrosarkomen analysiert und bestätigt. Dies war möglich durch die Entwicklung eines Protokolls für die Anwendung an felinen Zellen und für die Analyse und Quantifizierung von mikroskopischen 3D-Bildern. Im Ergebnis konnten wir einen Schwellenwert von 76 Fluoreszenzsignalen pro Kern festlegen, der nur von den felinen Fibrosarkom-Zelllinien und Tumorgeweben der felinen Fibrosarkom-Patienten überschritten wurde. Der beschriebene Ansatz könnte den Weg zu einer zuverlässigen Methode für die Diagnose von Fibrosarkomen bei Katzen und möglicherweise auch anderen Arten von Tumoren. Diese Arbeit befindet sich noch in der Entwicklung. Es wäre vorteilhaft, einen Algorithmus zu integrieren, der zwischen einzelnen Zellkernen unterscheiden und die Signale mit hoher Genauigkeit quantifizieren kann. Dazu wird ein hochauflösendes, fluoreszierendes Mikroskop verwendet. Durch die Verfolgung dieser Wege erwarten wir, einen Punkt zu erreichen, an dem wir diese Technik effizienter und mit viel weniger analysierten Zellkernen anwenden können, um Tumore zu diagnostizieren, indem wir das Vorhandensein von Aneuploidie über der Schwelle von 76 Chromosomen bestätigen und dadurch das Vorhandensein von Malignität bestätigen.
